無外泌體胎牛血清EXO-Free FBS Media

無外泌體胎牛血清EXO-Free FBS Media

NANOLAB品牌無外泌體胎牛血清

(EXO-Free FBS Media)

貨號：360-23

規(guī)格：50ml/瓶

保存溫度：-20℃

品牌：NANOLAB

產(chǎn)品描述：當(dāng)外泌體在1980年*被發(fā)現(xiàn)后，其被認為是細胞排泄廢物的一種方式，近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用，這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。exosome及其他細胞外囊泡正起著*的細胞通訊作用。在腫瘤發(fā)展過程中，exosome介導(dǎo)了關(guān)鍵的步驟，如刺激血管生成，削弱免疫反應(yīng)，甚至參與了轉(zhuǎn)移前微環(huán)境的形成。在正常的生理過程中，exosome也起了重要作用，如胎盤exosome幫助形成對母親免疫系統(tǒng)的免疫抑制屏障。總之，在正常和病理的條件下，細胞都釋放小囊泡，以各種方式影響其他細胞。

無外泌體血清可以特異性激發(fā)一些細胞反應(yīng)，表明它們可以在作為治療遞送載體方面有巨大的潛力。無外泌體血清的囊泡性質(zhì)使得它們適合作為用于藥物或核酸遞送的潛在納米載體。在這里，研究人員需要解決的問題是，無外泌體血清的大小分布也會影響外泌體的治療潛力。

1：利用聚合物沉淀分離的外泌體比超離法的粒子分布要小。

2：劃痕實驗證實聚合物沉淀所得的小粒徑的外泌體被細胞攝取后遷移更快。

產(chǎn)品應(yīng)用                         

360-23  EXO-Free FBS Media （無外泌體胎牛血清）操作手冊：

 對比

1):EXO-Free FBS Media大大降低了牛外泌體的含量

2):EXO-Free FBS Media去除了牛 CD63 外泌體

3):EXO-Free FBS Media 比超速離心FBS更*

4):EXO-Free FBS Media 具有無法檢測的牛microRNA水平

5):EXO-Free FBS Media與標(biāo)準(zhǔn)FBS的細胞生長曲線幾乎*

EXO-Free FBS Media大大降低了牛外泌體的含量

使用NANOLAB品牌Exo-FBS確保您的細胞或組織培養(yǎng)基中的外泌體制備僅包含來自細胞的外來體，而不是來自培養(yǎng)基中的FBS。 ELISA和NanoSight分析均證明，與標(biāo)準(zhǔn)FBS相比，Exo-FBS中牛外來體水平顯著降低。

NanoSight粒子分析在Exo-FBS中顯示超低外泌體殘留量

為了證明我們的Exo-FBS產(chǎn)品中外泌體的消耗，我們將標(biāo)準(zhǔn)FBS和Exo-FBS樣品1：1000稀釋，然后使用NanoSight LM10儀器分析粒徑和豐度。 標(biāo)準(zhǔn)FBS樣品顯示顯著量的外來體大小的微泡，其中Exo-FBS外泌體耗盡的FBS樣品具有外來體顆粒的急劇減少。

四跨膜蛋白CD63蛋白是外泌體的常見標(biāo)記物。 我們利用牛特異性抗CD63抗體開發(fā)酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）。 在該ELISA測定中使用等體積（50μl）的標(biāo)準(zhǔn)FBS或Exo-FBS耗盡的培養(yǎng)基補充物。 與標(biāo)準(zhǔn)FBS相比，Exo-FBS中CD63陽性牛外來體的量顯著減少（繪制的結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化為標(biāo)準(zhǔn)FBS的信號水平）。

NANOLAB品牌Exo-FBS比超速離心FBS更清潔

通過將NanoSight顆粒計數(shù)分析與源FBS，F(xiàn)BS超速離心18小時和外泌體耗盡的Exo-FBS產(chǎn)品進行比較，在NANOLAB生產(chǎn)的每批Exo-FBS上生成質(zhì)量控制數(shù)據(jù)。 所有樣品以1：100稀釋，并一式三份收集NTA數(shù)據(jù)。

結(jié)論：

使用NANOLAB品牌不含外泌體胎牛血清，您可以確信您分離的外泌體是由培養(yǎng)細胞產(chǎn)生的，而不是培養(yǎng)基中的污染物。

NANOLAB品牌不含外泌體胎牛血清具有無法檢測的牛microRNA水平

NANOLAB品牌不含外泌體胎牛血清不僅具有大大降低的外泌體水平，不含外泌體胎牛血清中的牛microRNA在高靈敏度qPCR測定中顯示不可檢測。 用Trizol提取方法處理標(biāo)準(zhǔn)FBS和Exo-FBS培養(yǎng)基補充物（4ml）以回收外來體RNA。 將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA，并使用QuantiMir系統(tǒng)通過qPCR測量72個單獨的牛microRNA。 在測試的72種微RNA中，12種在FBS樣品中產(chǎn)生擴增曲線，但在Exo-FBS樣品中沒有。

Exo-FBS與細胞生長的標(biāo)準(zhǔn)FBS相同

Exo-FBS不僅能夠有效隔離標(biāo)準(zhǔn)FBS中存在的污染物的外泌體，它支持與標(biāo)準(zhǔn)FBS相同的生長速率。

為了比較Exo-FBS與標(biāo)準(zhǔn)FBS中細胞的生長速率，我們在10％標(biāo)準(zhǔn)FBS或添加10％的Exo-FBS的*培養(yǎng)基中培養(yǎng)HT1080纖維肉瘤細胞，PC-3前列腺癌細胞，MCF-7乳腺癌細胞和HEK293細胞。。 將細胞接種于10,000或20,000個細胞，然后在標(biāo)準(zhǔn)條件下在37℃，5％CO ₂下在所示培養(yǎng)基中培養(yǎng)5天。 對細胞進行成像，計算生長速率并觀察細胞形態(tài)。 對于在這4種細胞系中測試的標(biāo)準(zhǔn)FBS和Exo-FBS培養(yǎng)基，觀察到等同生長和類似的細胞形態(tài)。